癌癥一直是一個全球性的健康問題。根據(jù)國際癌癥研究機(jī)構(gòu)發(fā)布的《2020年全球癌癥》，2020年全球約有1930萬新癌癥病例和近1000萬例癌癥患者死亡。

       注：左圖為2020年腫瘤新病例估計數(shù)

       右圖為2020年腫瘤估計死亡人數(shù)

       數(shù)據(jù)來源：GLOBCAN 2020

       圖形來源：Global Cancer Observatory

       目前，患者有多種治療方法可供選擇，包括化療、靶向治療和免疫治療等。

       靶向治療：使用是一種能夠靶向控制癌細(xì)胞生長、分裂和擴(kuò)散的蛋白質(zhì)的精準(zhǔn)藥物。其中，BRAFV600E突變、BCR-ABL融合蛋白、HER-2和表皮生長因子受體（EGFR）是靶向治療的一些重要靶點。大多數(shù)靶向藥物大致可分為兩類，包括小分子抗體和單克隆抗體。例如，羅氏王牌生物制劑Herceptin（trastuzumab）是一種美國FDA批準(zhǔn)的單克隆抗體，主要用于治療某些過表達(dá)HER-2間的乳腺癌和胃癌患者，而阿斯利康另一款美國FDA批準(zhǔn)的酪氨酸激酶抑制劑Iressa（gefitinib）則是一種一線治療用于轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌的小分子藥物，該藥物主要針對EGFR第19外顯子缺失或第21外顯子（L858R）替代突變。

       免疫療法：利用的是患者自身免疫系統(tǒng)對抗癌癥的能力。免疫治療是多種實體腫瘤的第一線治療選擇，而免疫系統(tǒng)的檢查點蛋白也可以被認(rèn)為是有效的治療靶點。例如，程序性細(xì)胞死亡蛋白1（PD-1）是人體免疫T細(xì)胞表面的檢查點蛋白，程序性死亡配體1（PD-L1）則是在腫瘤細(xì)胞表面過表達(dá)的免疫檢查點蛋白。PD-1和PD-L1之間的相互作用，使得腫瘤細(xì)胞能夠逃避T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。目前，幾種基于抗體的PD-1/PD-L1阻斷療法已經(jīng)證明了對幾種人類常見腫瘤的治療存在益處，美國FDA目前已經(jīng)批準(zhǔn)的針對免疫檢查點的治療性抗體如下表所示。

       表1：FDA批準(zhǔn)的PD-1和PD-L1治療方法

       除此之外，研究人員目前也正在積極研究新的靶點，包括具有Ig和EM結(jié)構(gòu)域的T細(xì)胞免疫受體（TIGIT）。在小鼠癌癥模型中，共同阻斷TIGIT和PD-L1的抗體可增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞效應(yīng)功能，抑制腫瘤生長。

       2021年1月，羅氏基于II期CITYSCAPE試驗的數(shù)據(jù)，宣布tiragolumab（一種抗TIGIT抗體）和atezolizumab聯(lián)合使用，在pd-L1陽性轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌中顯示出了令人鼓舞的療效和安全性。

       目前來看，單獨使用小分子靶向治療和免疫治療均顯示出良好的臨床效果。此外，這兩種方法的結(jié)合使用也有可能在患者中產(chǎn)生協(xié)同和更加持久的治療結(jié)果。例如，一項聯(lián)合dabrafenib（靶點為BRAFV600E）、trametinib（靶點為BRAFV600E或V600K或V600K）和pembrolizumab進(jìn)行的隨機(jī)II期臨床試驗結(jié)果顯示，與單獨接受三種藥物的患者相比，聯(lián)合用藥在改善無進(jìn)展生存期和增強(qiáng)反應(yīng)存在優(yōu)勢，不過三聯(lián)用藥的患者也顯示出了不良反應(yīng)的增強(qiáng)。

       01 重組藥物靶蛋白

       注：左圖為2020年全球腫瘤估計死亡人數(shù)

       右圖為2020年女性腫瘤估計死亡人數(shù)

       數(shù)據(jù)來源：GLOBCAN 2020

       圖形來源：Global Cancer Observatory

       根據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，肺癌是全球男性和女性癌癥死亡的主要原因，2020年預(yù)計有180萬人死亡（占比18%），其次是結(jié)直腸（占比9.4%）、肝 臟（占比8.3%）和胃部（占比7.7%）。非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）則是其中最常見的肺癌類型。在全球范圍內(nèi)，乳腺癌是女性中最致命的癌癥（占比15.5%）。EGFR與許多人類惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，包括頭頸部鱗狀細(xì)胞癌（HNSCC）、NSCLC、結(jié)腸直腸癌（CRC）和乳腺癌。為此，美國FDA也已經(jīng)批準(zhǔn)了多項針對這些類型腫瘤的EGFR抑制劑。EGFR配體阻斷抗體cetuximab和panitumumab可以靶向EGFR的胞外結(jié)構(gòu)域，而gefitinib和erlotinib是酪氨酸激酶抑制劑，可與EGFR的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相互作用。未來，生物制藥市場上有望設(shè)計出更多包含這些蛋白的胞外或胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域產(chǎn)品。

       A.人類EGFR His標(biāo)簽（AA 25-645）

       B.人類EGFR His和GST標(biāo)簽（AA668-1210）

       圖注：含有蛋白質(zhì)胞外結(jié)構(gòu)域或胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的產(chǎn)物

       (A)EGF與EGFR的結(jié)合試驗：以2μg/ml的濃度固定化的人EGF hFc(Cat：10605-H01H)，可結(jié)合人EGFR His(Cat：10001-H08H)

       (B)EGFR(AA668-1210）的比活性測定方法

       除此之外，腫瘤細(xì)胞為了保護(hù)自己，還可以通過遠(yuǎn)離免疫細(xì)胞，來逃避患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)的檢測。這一過程是通過配體－受體結(jié)合激活信號通路來實現(xiàn)的。受體－配體的相互作用也損害了患者對抗腫瘤的免疫力。例如，在許多癌癥類型中，CD47（配體）與信號調(diào)節(jié)蛋白a（SIRPa）受體的結(jié)合，會觸發(fā)了一個抑制性信號通路，使得惡性細(xì)胞能夠逃脫巨噬細(xì)胞的吞噬消除，而一些免疫檢查點治療性抗體則能夠通過阻斷配體－受體的結(jié)合來增加患者的抗腫瘤活性。

       目前，阻斷PD-1及其配體PD-L1的治療性抗體已被科學(xué)研究證明具有臨床療效，而抗CD47抗體也可以通過阻斷CD47與SIRPa的結(jié)合來增強(qiáng)患者機(jī)體對于腫瘤細(xì)胞的吞噬作用。因此，在試驗設(shè)計支持以及相關(guān)研究的工具時，充分考慮到配體－受體配對試驗造成的影響是十分重要的。

       02 細(xì)胞因子

       在部分抗體的功能分析時可能還需要在細(xì)胞上進(jìn)行測試，而在這種情況下通常就會使用細(xì)胞因子來解決。例如，在T細(xì)胞和NK細(xì)胞上表達(dá)的TIGIT是抗腫瘤效應(yīng)因子，而TIGIT能夠抑制NK細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，進(jìn)一步阻斷TIGIT可恢復(fù)NK和T細(xì)胞的功能。在進(jìn)行NK細(xì)胞和TIGIT阻斷功能測定時，添加細(xì)胞因子IL-12或細(xì)胞因子混合物（IL-12、IL-15 和 IL-18）可以實現(xiàn)刺激NK細(xì)胞的效果。目前，市面上已經(jīng)開發(fā)了一系列細(xì)胞因子，以便支持研發(fā)人員進(jìn)行和完成各種功能測定。

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