目前，在抗炎的臨床治療中，阿司匹林、布洛芬和萘普生等非甾體抗炎藥 (NSAID) 扮演了重要角色。然而，NSAIDs是COX-1/2的非特異性抑制劑，所以在達(dá)到抗炎鎮(zhèn)痛目的的同時，也可能會引起廣泛的不良反應(yīng)，比如損害胃腸道并導(dǎo)致腎 臟、心血管和 肝 臟功能障礙等。此后，科學(xué)家們又開發(fā)了COX-2選擇性小分子抑制劑（昔布），然而，數(shù)據(jù)顯示，長期服用昔布與嚴(yán)重心臟副作用有關(guān)。
為了減輕非選擇性COX抑制相關(guān)副作用，尋找新的靶標(biāo)，開發(fā)新一代抗炎療法成為研發(fā)重點。
1. 從COX到EP2
環(huán)氧合酶 (COX) 是花生四烯酸 (AA)合成前列腺素的關(guān)鍵酶。COX目前已知的異構(gòu)體有兩種：COX-1和COX-2，分別由ptgs1和ptgs2編碼。CoX-1表達(dá)于血管、胃、腎和血小板等絕大多數(shù)組織，參與血小板聚集、血管舒縮、胃黏膜血流以及腎血流的調(diào)節(jié)，以維持細(xì)胞，組織和器官生理功能的穩(wěn)定。COX-2通常在大多數(shù)正常組織和器官中以低基礎(chǔ)水平表達(dá)。
在炎癥或有害刺激下，花生四烯酸（AA，一種20碳脂肪酸）通過cPLA2從細(xì)胞膜釋放，然后通過COX轉(zhuǎn)化為PGH2。短壽命PGH2被組織特異性前列腺素合成酶進(jìn)一步催化為五種類型的前列腺素：PGD2、PGE2、PGF2α、PGI2和TXA2。負(fù)責(zé)將PGH2 轉(zhuǎn)化為PGE2的三種同工酶是mPGES-1、mPGES-2和cPGES（圖1）。
有研究表明，靶向誘導(dǎo)型mPGES-1可抑制COX-2衍生的PGH2合成PGE2，不會影響其他類型的前列腺素，被認(rèn)為比抑制COX-2本身更具特異性。然而，由于mPGES-1酶的序列和結(jié)構(gòu)的種間差異，設(shè)計和測試mPGES-1酶抑制劑非常復(fù)雜。
因此，為了避免因抑制PGE2生物合成酶而引起的并發(fā)癥，下游的PGE2受體EP2被認(rèn)為有望作為替代靶標(biāo)，成為更具特異性的靶點。
2. PGE2/EP2 信號通路
前列腺素受體EP2可與 Gs （由α、β和γ 亞基組成的異源三聚體）組成蛋白復(fù)合物。PGE2對EP2受體的激活將Gs復(fù)合物迅速分離為Gα和Gβγ，反過來又調(diào)節(jié)了不同的下游信號分子，這些分子也可以與許多其他途徑進(jìn)行交互（圖2）。EP2受體的激活既可以導(dǎo)向G-蛋白偶聯(lián)信號通路，也可以導(dǎo)向獨立信號通路，這些通路通常與其他通路（包括 EGFR介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)）進(jìn)行交互。因此，可以通過靶向EP2受體開發(fā)選擇性小分子拮抗劑以緩解由EP2受體介導(dǎo)的下游病理過程。
3. 多家企業(yè)布局EP2拮抗劑
EP2基因消融 (EP2–/–)是早期研究中的一種抑制策略，用于闡明EP2受體的生理和病理作用。雖然非常有用，但它也因小鼠的發(fā)育和其他穩(wěn)態(tài)調(diào)整而變得復(fù)雜，導(dǎo)致高血壓和產(chǎn)仔數(shù)減少。
已廣泛使用的EP2受體小分子激動劑包括布托前列素、CP-533536、CAY10399、ONO-AE1-259 和 C-9（圖 3）。然而，布托前列素對EP2的選擇性僅約為EP3的18倍；CP-533536 (evatanepag)對EP2的選擇性約為EP4的64倍；CAY10399和ONO-AE1-259對EP2 具有高度選擇性但具有類前列腺素樣結(jié)構(gòu)；C-9對其他PGE2受體的選擇性相當(dāng)高，但對TP受體的選擇性不到四倍。
此外，還有報道具有非前列腺素結(jié)構(gòu)的EP2正變構(gòu)調(diào)節(jié)劑，并提供了替代化學(xué)探針來研究PGE2存在下的受體；然而，其藥代動力學(xué)具有不確定性，阻礙了在體內(nèi)的使用。
3.1.輝瑞開發(fā)的EP2拮抗劑
2011年，輝瑞(Pfizer)報告了其首 個EP2選擇性拮抗劑化合物1（圖4），該拮抗劑在體外和體內(nèi)試驗中均顯示出活性。在不存在PGE2或其他激動劑的情況下，化合物1不顯示任何激動活性，也不會對EP2產(chǎn)生任何影響。這些結(jié)果表明它特異性地抵消了作用于EP2受體的PGE2或其他激動劑的作用。兩年后，輝瑞報告了其第二個 EP2 選擇性拮抗劑，化合物2。
3.2.埃默里開發(fā)的化合物
2008年，埃默里大學(xué)的研究人員利用一組基于細(xì)胞的時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (TR-FRET) 分析cAMP形成，對262371種化合物進(jìn)行了高通量篩選 (HTS)。由于當(dāng)時缺乏真正的選擇性EP2拮抗劑，他們的目標(biāo)是開發(fā)選擇性抑制 EP2受體的化合物，用于研究長期癲癇引起的腦部炎癥。因此，一系列小分子被鑒定為人類EP2受體的競爭性拮抗劑。其中，化合物3（圖5）最有效，其功能性Schild KB為2.4 nM，可拮抗PGE2，血漿半衰期(t1/2)為0.6小時，腦與血漿之比為0.3。隨后的構(gòu)-效關(guān)系發(fā)現(xiàn)了相關(guān)衍生物（4~7）（圖5）。
3.3.安進(jìn)開發(fā)的化合物
2015年，Amgen的研究人員通過高通量篩選鑒定出一種新型 EP2 拮抗劑，化合物8（圖6）?；衔?對人類、小鼠和大鼠受體具有輕度至中度效力。在選擇性測試中，其EP2/EP1受體的選擇性 400，對EP2/EP3的選擇性~300，但對EP2/EP4（PGE2的另一種 Gαs 偶聯(lián)受體）的選擇性只有50。在構(gòu)-效關(guān)系研究中，又發(fā)現(xiàn)了化合物9。
4. 小結(jié)
在經(jīng)歷了長期使用環(huán)加氧酶-2 (COX-2) 抑制劑導(dǎo)致的相關(guān)副作用之后，人們廣泛認(rèn)為，對于炎癥治療，與其簡單地關(guān)閉整個COX級聯(lián)反應(yīng)，不如調(diào)節(jié)下游前列腺素合成酶或受體。
長期以來，人們一直將COX-2的致病作用歸因于PGE2通過其Gαs偶聯(lián)的EP2受體亞型發(fā)出信號。然而，真正具有選擇性的EP2拮抗劑直到2011年才出現(xiàn)。這些小分子提供了全新的治療或研究方法，可以幫助研究人員更好地了解炎癥相關(guān)疾病中的EP2受體。它們在臨床前模型中的應(yīng)用也重塑了人們對PGE2/EP2信號作為健康和疾病炎癥節(jié)點的認(rèn)識。
今年，在選擇性EP2拮抗劑發(fā)現(xiàn)10周年之際，探索它們作為下一代抗炎療法候選藥物的潛力才剛剛開始顯現(xiàn)，期待未來能造福更多炎癥患者。
參考文獻(xiàn)
Sluter, Madison N., Ruida Hou, Lexiao Li. et al. EP2 Antagonists (2011–2021): A Decade’s Journey from Discovery to Therapeutics. J. Med. Chem. 2021, 64, 11816–11836
責(zé)任編輯：琉璃
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